諾博萊德  動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit

動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒質粒提取

產品貨號：D9588

產品名稱：動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit

英文名稱：Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit

產品規格：50T/100T

產品簡介：

儲存條件：酶附件-20℃，其它試劑RT，復檢期1年

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

   NobleRyderD9588  動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒本試劑盒采用可以特異性結合DNA的離心吸附柱和du特的緩沖液系統，提取組織和細胞的基因組DNA。 離心吸附柱中采用的硅基質材料為本公司te有新型材料，能夠高效、專一吸附DNA，可最大限度去除雜質蛋白及細胞中其他有機化合物。 提取的基因組DNA片段大，純度高，質量穩定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規操作，包括酶切、 PCR、文庫構建、Southern雜交等實驗。

操作步驟：

1. 樣品的處理：

(1) 細胞：取1×106-1×107個懸浮培養細胞，12000rpm離心1min收集細胞，貼壁細胞先用yi蛋白酶消化處理，再用預冷的PBS吹打成細胞懸液，然后12000rpm離心1min收集細胞，盡量除去上清，加200μL溶液A，振蕩至che底混勻。

(2) 組織：組織量不宜過大，一般不要超過25mg，可以使用勻漿器勻漿，最好用液氮研磨成粉末狀，再用預冷的PBS或無菌水充分懸浮，然后12000rpm離心1min收集細胞，盡量除去上清，加200μL溶液A，振蕩至che底混勻。

2. 向懸浮液中加入2μL RNase A，55℃放置5min。

3. 加入20μL的蛋白酶K，充分顛倒混勻，56℃水浴消化，細胞消化時間較短，組織消化時間較長，一般需要1-3個小時才能完成（鼠尾需要消化過夜）。消化期間可顛倒離心管混勻數次，直至樣品消化wan全為止。消化wan全的指標是：液體清亮及粘稠。

4. 加入200μL體積溶液B，充分顛倒混勻，如出現白色沉淀，可在75℃放置15-30min，沉淀即會消失，不影響后續實驗。如溶液未變清亮，說明樣品消化不che底，可能導致提取的DNA量少及不純，還有可能導致堵塞吸附柱。

5. 加入200μL無水乙醇，充分振蕩混勻15s，溶液變清亮。此時可能會出現絮狀沉淀，不影響DNA的提取，將溶液和絮狀物都加入吸附柱中。

6. 12000rpm 離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。

7. 向吸附柱中加入600μL 漂洗液（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），12000rpm 離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。

8. 重復步驟7。

9. 12000rpm 離心 2min，將吸附柱敞口置于室溫或 50℃溫箱放置數分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，否則漂洗液中的乙醇會影響后續的實驗如酶切、PCR等。

10. 將吸附柱放入一個干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加50-200μL經65℃水浴預熱的洗脫液，室溫放置5min，12000rpm離心2min。

11. 可將離心所得洗脫液再加入吸附柱中，12000rpm 離心 2min，即可得到高質量的基因組DNA。

注意事項：

1. 試劑盒拆封后，RNase A和蛋白酶K需放置-20℃保存。

2. 樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA片段較小且提取量也下降。

3. 如果試劑盒中的溶液出現沉淀，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影響效果。

4. 洗脫緩沖液的體積最好不少于50μL，體積過小會影響回收效率：洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響，若需要用水做洗脫液應保證其pH值在8.0左右（可用NaOH將水的pH值調至此范圍），pH值低于7.0會降低洗脫效率。

動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒質粒提取

產品訂購信息

D9588  動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit  50T

D9588  動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit  100T