諾博萊德 酵母核蛋白提取試劑盒

酵母核蛋白提取試劑盒 常備現貨

產品貨號：P5041

產品名稱：酵母核蛋白提取試劑盒

產品規格：50T/100T

產品簡介：

中文名稱：酵母核蛋白提取試劑盒

規格：100T ; 50T

儲存條件：2-8℃，1 year

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

NobleRyder P5041 酵母核蛋白提取試劑盒

酵母核蛋白提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種酵母中提取核蛋白。提取過程簡單方便。制備的核蛋白純度高，保持天然活性，絕少交叉污染。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。本試劑盒提取的蛋白可用于WesternBlotting、蛋白質電泳、免疫沉淀、ELISA、轉錄活性分析、Gelshift凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。本試劑盒中不含有EDTA，與金屬螯和層析等下游應用兼容。

適用樣本：動物細胞/組織

注：

1. 蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。

2. 蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。

3. 試劑拆封后請盡快使用完！

產品簡介：

酵母核蛋白提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種酵母中提取核蛋白。提取過程簡單方便。制備的核蛋白純度高，保持天然活性，絕少交叉污染。

本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。

本試劑盒提取的蛋白可用于 Western Blotting、蛋白質電泳、免疫沉淀、ELISA、轉錄活性分析、Gel shift 凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。

本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。

本試劑盒中不含有EDTA，與金屬螯和層析等下游應用兼容。

自備試劑和儀器：

離心機、振蕩器、渦旋混勻器、移液器、冰箱、冰盒，PBS緩沖液、蛋白定量試劑盒，離心管、吸頭、一次性手套

產品特點：

1、使用方便，從細胞，組織中提取蛋白不需經過研磨、反復凍融、超聲破碎等前處理。

2、將蛋白提取的時間縮短至 30 分鐘-1 小時。

3、含蛋白穩定劑，提取的蛋白穩定。

4、紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。

5、蛋白提取液含多種有效成分，可以充分釋放胞漿蛋白、核蛋白，又可結合釋出的蛋白防止沉淀。

6、蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含 6 種獨立的蛋白酶抑制劑 AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲an酸蛋白酶、半胱an酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

使用方法：

一、使用注意事項：

1、旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。

2、實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

3、蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

4、如果試劑盒不能短時間內用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。

5、可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

6、蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴，變成液體

狀態后離心 至管底部再開蓋。

二、操作步驟

1. 提取液準備：

每200ul蛋白提取液D中分別加入2ul蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。

2. 酵母培養物，在4℃，1000×g條件下離心5-10分鐘，小心吸取培養基，盡可能吸干，收集酵母沉淀。

3. 用PBS洗滌酵母兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。

4. 每100ul體積酵母沉淀物中加入200ul酵母核蛋白提取液A，混勻后，在30℃條件下保溫 15分鐘。

5. 在1000×g條件下離心5-10分鐘，棄上清，收集酵母沉淀。

6. 用500ul PBS洗滌酵母一次，離心收集菌體。

7. 酵母沉淀物中加入300-500ul酵母蛋白提取液B，充分混勻。

8. 在37℃或室溫條件下輕微振蕩45-60分鐘。

9. 在1000×g條件下離心5-10分鐘，收集沉淀，棄上清。

10. 用500ul PBS洗滌沉淀。離心收集沉淀。

11. 沉淀中加入400ul酵母核提取液C，高速渦旋15秒混勻，然后在振蕩器上振蕩15-30分鐘。

12. 再次高速渦旋振蕩5秒，然后在4℃，2000×g條件下離心5分鐘，棄上清，留沉淀。

13. 在沉淀中加入200ul冷的核蛋白提取液D，充分混勻。

14. 置振蕩器上振蕩30-40分鐘。

15. 在4℃，12000×g條件下離心10分鐘。

16. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即可得到酵母核蛋白。

17. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優化實驗條件，取得優良實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并che底清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。

酵母核蛋白提取試劑盒 常備現貨

產品訂購信息：

P5041  酵母核蛋白提取試劑盒  50T/100T