諾博萊德 氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit

氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒 細胞

產品貨號：BC9963

產品名稱：氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit

英文名稱：Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit

產品規格：100T/96S

產品簡介：

產品別名：氧化型gu胱甘肽含量測定試劑盒/GSSG Kit 氧化型gu胱甘肽（GSSG）含量測定試劑盒/氧化型gu胱甘肽（GSSG）含量測試盒

檢測方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

儲存條件：Store at 2-8℃，6 months

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

NobleRyderBC9963 氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit是gu胱甘肽(GSH)的化形式，又稱為二硫代gu甘肽，是兩分子的gu胱甘肽氧化而成。GSSG 會被gu胱甘肽還原酶還原成GSH，因此機體中大多數是以還原型形式存在。測定細胞內GSH 和GSSG含量以及GSHGSSG比值，能夠很好地反映細胞新處的氧化還原狀態。本試劑盒利用gu胱甘肽能和5.5-二硫代-雙-(2-硝基苯甲酸)(5.5'-dithiobis-2-nitrobenoic acid，DTNB)反應產生 2-硝基-5-巰基苯甲酸，2-硝基-5-巰基苯甲酸在波長 412nm 處具有最大光吸收的特點，通過 2-乙烯吡啶抑制樣本中原有的還原型gu胱甘肽，然后利用gu胱甘肽還原酶將GSSG還原為GSH，借此測定氧化型gu胱甘肽的含量。

技術指標:

*低檢出限:3.2llHg/mL

線性范圍:3.9-125 ug/mL

注意:實驗之前建議選擇 2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、分析天平、低溫離心機、水浴鍋/恒溫培養箱、移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、勻漿器/研缽/細胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。

操作步驟:

一、樣本處理(可適當調整待測樣本量，具體比例可以參考文獻)

1、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織，加入1mL 試劑一)進行冰浴勻漿(勻漿器/研缽提前放冰上預冷)。12000g，4℃離心10min，取上清液放置于4℃待測。若暫時不能完成測試可放于-80℃C保存(可保存3天)。

2、細菌、細胞:按照細胞數量(106個):試劑一體積(mL)為5~10:1的比例(建議5百萬細胞加入1mL 試劑一)，反復凍融2-3次(可在液氮中凍結、37℃℃水浴中溶解)或者冰浴超聲波破碎細胞(功率200w，超聲 3s,間隔10s，重復30次)，12000g，4C離心10分鐘，取上清置于冰上待測。若暫時不能完成測試可放于-80℃保存(可保存3天)。

3、血液處理

血漿:將收集的抗凝血于4℃，600g離心10分鐘，吸取上層血漿到另一支試管中，加入等體積的試劑一，沸水浴 5min(纏封口膜，防止爆蓋)。之后I2000g，4℃離心 10 分鐘，將上清移入新的試管中放置于 4℃待測，若暫時不能完成測試可放于-80C保存(可保存3天)。

血細胞:將收集的抗凝血于4℃，600g離心10分鏟，棄去上層血漿用3倍體積的PBS 清洗3次(用PBS重懸血細胞，600g離心 10分鐘)，加入等體積試劑一，沸水浴5min(纏封口膜，防止爆蓋)。之后12000g，4℃離心10分鐘，吸取上清放于4℃待測，若暫時不能完成測試可放于-80℃保存(可保存3天)。

注意事項:

1.若不確定樣本中 GSSG 含量的高低，可稀釋幾個梯度后再進行測量。

2. 如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣云量或者稀釋樣本后再進行測定。

3.因為試劑一中含有蛋白質沉淀劑，因此上清液不能月于蛋白濃度測定。如測定蛋白含量，需另取組織。

氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒 細胞

產品訂購信息

BC9963 氧化型gu胱甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒Oxidized Glutathione(GSSG) Content Assay Kit  100T/96S