諾博萊德 骨組織蛋白提取試劑盒

骨組織蛋白提取試劑盒 常備現(xiàn)貨

產(chǎn)品貨號：P4924

產(chǎn)品名稱：骨組織蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡介：

中文名稱：骨組織蛋白提取試劑盒

規(guī)格：50T ; 100T

儲存條件：2-8℃，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder P4924 骨組織蛋白提取試劑盒

適用樣本：動物組織

產(chǎn)品介紹

骨組織總蛋白提取試劑盒適用于從各種動物骨組織中樣品中提取總蛋白。可以提取各種密質(zhì)骨與松質(zhì)骨、軟骨組織樣品。可以用于新鮮骨組織樣本或脫鈣骨組織樣本。提取過程簡單方便，可在1小時內(nèi)完成。

該試劑盒蛋白提取液能充分裂解骨細(xì)胞，成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞，其中含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。

本試劑盒提取的蛋白可用于 Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫沉淀、ELISA、轉(zhuǎn)錄活性 分析、Gel shift 凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。

本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白，下游應(yīng)用范圍廣，提取液裂解細(xì)胞 的能力較溫和，需要根據(jù)實際樣本情況優(yōu)化裂解時間。

注：

1. 蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。

2. 蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。

3. 試劑拆封后請盡快使用完！

產(chǎn)品簡介：

骨組織總蛋白提取試劑盒適用于從各種動物骨組織中樣品中提取總蛋白。可以提取各種密質(zhì)骨與松質(zhì)骨、軟骨組織樣品。可以用于新鮮骨組織樣本或脫鈣骨組織樣本。提取過程簡單方便，可在1小時內(nèi)完成。該試劑盒蛋白提取液能充分裂解骨細(xì)胞，成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞，其中含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。

本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫沉淀、ELISA、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。

本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白，下游應(yīng)用范圍廣，提取液裂解細(xì)胞的能力較溫和，需要根據(jù)實際樣本情況優(yōu)化裂解時間。

自備試劑和儀器

離心機、振蕩器、勻漿機/勻漿器、渦旋混勻器、移液器、冰箱、冰盒，PBS緩沖液、蛋白定量試劑盒，離心管、吸頭、一次性手套

產(chǎn)品特點：

1、使用方便。

2、含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。

3、紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。

4、蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含 6 種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性。

使用方法：

一、      使用注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得優(yōu)良實驗效果

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3. 實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

4. 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

5. 如果試劑盒不能短時間內(nèi)用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。

6. 可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

7. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

8. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

二、操作步驟

1. 提取液制備：

根據(jù)樣本數(shù)量，按每500μl冷的骨組織蛋白提取液A中加入2μl蛋白酶抑制劑和2μl蛋白穩(wěn)定劑，混勻

后置2-8℃?zhèn)溆谩?/span>

2. 取新鮮骨組織樣品，在4℃，用pH7.4的PBS緩沖液或生理鹽水中充分浸泡。換新鮮生理鹽水/PBS

再次充分浸泡，然后用純水清洗，去除血液，紅細(xì)胞。

3. 將骨組zhi剪碎，稱重后放入裝有液氮的研缽中，將骨組織磨成粉末，保持液氮不能wan全揮發(fā)。

4. 將骨組織粉末加入離心管中，按每200mg骨組織加入500μl蛋白提取液。

5. 混勻后在4℃條件下振蕩30分鐘。

6. 在80-100w，5s超聲/5s間隔條件下冰浴超聲20次。

7. 在4℃，12000×g條件下離心10分鐘。

8. 將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，即得到骨組織總蛋白。

9. 上述蛋白提取物直接用于下游實驗或分裝后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/span>

常見問題分析：

①提取速度慢？

為了充分保證提取得到的蛋白的活性，提取液采用du特的保護蛋白的配方，裂解能力溫和，下游應(yīng)用范圍廣。適當(dāng)延長裂解的時間即可。

②蛋白濃度低？

處理部分組織樣本時可能沒有裂解wan全，導(dǎo)致蛋白濃度低。只要適當(dāng)延長試劑A的處理時間即可。最好在持續(xù)振蕩的條件下處理，沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。

③用什么方法定量蛋白？

建議用BCA法。不適合用Bradford法，因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份，導(dǎo)致定量不準(zhǔn)。如果已經(jīng)進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系，則可以用Bradford法定量。

④提取的蛋白具有活性嗎？

本試劑盒不含有離子型去垢劑組份，不破壞蛋白的結(jié)構(gòu)，沒有對蛋白質(zhì)之間原有的相互作用的破壞，蛋白均保持其天然構(gòu)象和活性。

注意事項：

1. 本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并che底清除殘留清潔劑。

3. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

4. 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

骨組織蛋白提取試劑盒 常備現(xiàn)貨

產(chǎn)品訂購信息：

P4924  骨組織蛋白提取試劑盒  50T/100T