諾博萊德 組織胞漿/胞核分離試劑盒

組織胞漿/胞核分離試劑盒  蛋白提取

產(chǎn)品貨號：P5106

產(chǎn)品名稱：組織胞漿/胞核分離試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

產(chǎn)品簡介：

中文名稱：組織胞漿/胞核分離試劑盒

規(guī)格：100T ; 50T

儲(chǔ)存條件：2-8℃，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder P5106 組織胞漿/胞核分離試劑盒

組織樣本細(xì)胞核/胞漿分離試劑盒可以從各種動(dòng)物實(shí)體組織如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等組織樣本中分離細(xì)胞核和胞漿組分。此試劑盒提供了一個(gè)系統(tǒng)，維持核和胞漿組分是分開和完整的。優(yōu)化的試劑配方和程序可以快速分離胞核和胞漿，而幾乎沒有交叉污染。本試劑盒提取的胞核和胞漿組分仍保持其生化功能，適合下游分析如轉(zhuǎn)錄活性，RNA拼接，gel－shift分析，報(bào)告分析，酶活性分析和WB等。本試劑盒提取得到的為完整結(jié)構(gòu)的細(xì)胞核，需要提取得到核蛋白請選擇其它貨號的試劑盒產(chǎn)品。可以提供針對動(dòng)物細(xì)胞、組織、植物、真菌、酵母、微生物、藻類、液體、土壤等各種不同樣本的蛋白提取試劑盒。可以提供針對細(xì)胞膜、核、胞質(zhì)、線粒體、溶酶體、高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、外泌體等細(xì)胞不同部位的蛋白提取試劑盒。

適用樣本：動(dòng)物組織

注：

1. 蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲(chǔ)存。開蓋使用后-20℃儲(chǔ)存。

2. 蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時(shí)是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。

3. 試劑拆封后請盡快使用完！

產(chǎn)品簡介：

組織樣本胞漿/胞核分離試劑盒可以從從各種動(dòng)物實(shí)體組織如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等組織樣本中分離細(xì)胞核和胞漿組分。此試劑盒提供了一個(gè)系統(tǒng)，維持核和胞漿組分是分開和完整的。優(yōu)化的試劑配方和程序可以快速分離胞核和胞漿，而幾乎沒有交叉污染。

本試劑盒提取的胞核和胞漿組分仍保持其生化功能，適合下游分析如轉(zhuǎn)錄活性，RNA拼接，gel －shift分析，報(bào)告分析，酶活性分析和WB等。

本試劑盒提取得到的為完整結(jié)構(gòu)的細(xì)胞核。

自備試劑和儀器：

離心機(jī)、振蕩器、勻漿器/勻漿機(jī)、渦旋混勻器、移液器、冰箱、冰盒，PBS緩沖液、蛋白定量試劑盒，離心管、吸頭、一次性手套

使用方法：

一、使用注意事項(xiàng)：

1、旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時(shí)液體灑落。

2、實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。

3、蛋白酶抑制劑儲(chǔ)存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

4、可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

二、操作步驟

1、取50mg-100mg 組織樣本，用PBS洗干凈，用手術(shù)jian刀盡可能剪碎，加入500μl冷的試劑A，用組

織勻漿機(jī)/勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。（也可以用液氮研磨后加入500μl試劑A）

2、將勻漿液置2-8℃條件下振蕩20-30分鐘。

【注】：

①用振蕩器/搖床的較低轉(zhuǎn)速，保持液體有輕微晃動(dòng)即可。沒有振蕩條件的話，也可冰上靜置，稍微延長處理時(shí)間，中間每隔 5 分鐘渦旋振蕩或移液器吹打混勻。

②組織樣本根據(jù)實(shí)驗(yàn)情況調(diào)整，每次的提取液用量并不是一定的，大約為細(xì)胞體積的5-10倍即可，請根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整。

③可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要在每500ul提取液A中加入2ul蛋白酶抑制劑。

3、在 4℃，1200×g 條件下離心5 分鐘。

4、將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，即得到胞漿組分，請置冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。

5、沉淀用PBS重懸，然后在4℃，2000×g條件下離心5分鐘，棄上清。

7、沉淀為細(xì)胞核組分，將沉淀用200ul保存液B重懸后保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得優(yōu)良實(shí)驗(yàn)效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并che底清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

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