諾博萊德 酵母線粒體提取試劑盒

酵母線粒體提取試劑盒 蛋白提取

產品貨號：P5136

產品名稱：酵母線粒體提取試劑盒

產品規格：50T/100T

產品簡介：

中文名稱：酵母線粒體提取試劑盒

規格：100T ; 50T

儲存條件：2-8℃，1 year

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

NobleRyder P5136 酵母線粒體提取試劑盒

適用樣本：酵母

注：

1. 酵母洗滌液長期不用可以-20℃保存。

2. 試劑拆封后請盡快使用完！

產品簡介：

線粒體(mitochondria)是真核細胞中產生能量的重要細胞器。細胞中的能源物質—脂肪、糖、部分氨基酸在此進行最終的氧化，并通過偶聯磷酸化生成ATP，供給細胞生理活動之需。對線粒體結構與功能的研究通常是在離體的線粒體上進行的。

酵母線粒體提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種酵母樣品中提取線粒體。提取過程簡單方便。

本試劑盒不能用于冷凍樣品的線粒體提取。

自備試劑和儀器：

離心機、振蕩器、渦旋混勻器、移液器、冰箱、冰盒、PBS緩沖液、離心管、吸頭、一次性手套

使用方法：

一、使用注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優化實驗條件，取得優良實驗效果

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3. 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

二、酵母線粒體提取：

1. 酵母培養物，在4℃，1000×g 條件下離心5-10 分鐘，小心吸取培養基，盡可能吸干，收集酵母沉淀。

2. 用PBS洗滌酵母兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。

3. 每100μl 體積或100mg濕重酵母沉淀物中加入400μl酵母線粒體提取液A，混勻后，在30℃條件

下保溫 15 分鐘。

4. 在1000×g 條件下離心 5-10 分鐘，收集酵母沉淀。

5. 用300μl 酵母洗滌液D洗滌酵母一次，離心收集酵母。

6. 酵母沉淀物中加入500μl 酵母線粒體提取液B，充分混勻后。

7. 在37℃或室溫條件下輕微振蕩60-90分鐘。

8. 在2000×g 條件下離心5-10分鐘，棄上清，收集沉淀。

9. 沉淀用300μl酵母洗滌液D洗滌兩次。離心收集沉淀。

10. 在沉淀中加入400μl酵母線粒體提取液C，充分混勻，然后在振蕩器上振蕩10-30分鐘。

11. 在4℃，500×g條件下離心5分鐘，棄沉淀，收集上清。

12. 將上清吸入另一干凈離心管。

13. 在4℃，12000×g條件下離心20分鐘。棄上清，收集沉淀。

14. 在沉淀中加入400μl線粒體保存液 E，混勻。

15. 在4℃，12000×g條件下離心20分鐘。棄上清，收集沉淀。即得到酵母線粒體樣品。

16. 根據下游實驗需要，將沉淀用相應的緩沖溶液重懸。置冰箱備用或直接用于下游實驗。

注意事項：

1. 本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。

2. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并che底清除殘留清潔劑。

3. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。

4. 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

5. 如果試劑不小心接觸皮膚或眼睛，應立即用水沖洗。

酵母線粒體提取試劑盒 蛋白提取

產品訂購信息：

P5136  酵母線粒體提取試劑盒  50T/100T