諾博萊德 酸性磷酸酶染色試劑盒偶氮偶聯法 酶類染色

NobleRyder G9279 酸性磷酸酶染色試劑盒(偶氮偶聯法)，Acid Phophatase Stain Kit(Kaplow’s Azo Coupling Method)

產品貨號：G9279

產品名稱：酸性磷酸酶染色試劑盒(偶氮偶聯法)，Acid Phophatase Stain Kit(Kaplow’s Azo Coupling Method)

產品規格：4*2ml / 4*10ml / 4*20ml

產品簡介：

中文名稱:酸性磷酸酶染色試劑盒(偶氮偶聯法)

英文名稱:Acid Phophatase Stain Kit(Kaplow’s/Azo Coupling Method)

規格:4*2ml ; 4*10ml ; 4*20ml

儲存條件:-20℃，避光保存，有效期6個月。

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

NobleRyder G9279 酸性磷酸酶染色試劑盒(偶氮偶聯法)，Acid Phophatase Stain Kit(Kaplow’s Azo Coupling Method)產品介紹

酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP)分布極廣泛，遍布各種組織，主要存在于細胞的溶酶體內，所以常作為溶酶體標志酶。溶酶體外的酸性磷酸酶存在于內質網和胞質內。各種動物中的酸性磷酸酶各有不同，酸性磷酸酶的適宜pH為4.5～5.5。酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯法)以萘酚AS-BI為底物，在酸性pH下被酸性磷酸酶水解釋放出磷酸和萘酚，萘酚與重氮鹽偶聯生成有色產物，定位于細胞質中。對某些酸性磷酸酶來講，Cu2+、酒石酸根離子和四氯化碳以及醛類也都是抑制劑，Mn2+為該酶的激活劑。多用于新鮮血涂片、細胞涂片、冰凍切片等，亦可用于石蠟切片。

操作步驟：(僅供參考)

 (一) 樣本處理：

1、 細胞涂片：取新鮮全血或骨髓制備涂片，推玻片于載玻片保持30度，置于血液或細胞滴液的正前方，稍往后移與血液或細胞滴液接觸使后者沿推片下緣散開，再勻速沿載玻片平面平穩向前滑動至均勻鋪開為止，自然晾干。

2、 貼壁培養細胞、細胞爬片：吸去培養基，1×PBS清洗3-4次，瀝去多余水分。取出細胞爬片。

3、 冰凍切片：從冰箱取出放置恢復室溫，浸入蒸餾水清洗1-2min，瀝去多余水分。

4、 石蠟切片：石蠟切片脫蠟5-10min，重復一次。無水乙醇5min，90%乙醇和70%乙醇各2min，蒸餾水浸洗2min，瀝去多余水分。

(二) 染色孵育：

1、 使用2-8℃預冷的ACP固定液固定30s-3min，多數情況下30-60s即可。

2、 蒸餾水洗，瀝去多余水分(不宜過分干燥)。

3、 （切片處理）滴加ACP孵育液覆蓋切片，置于濕盒內37℃溫箱孵育45-60min，蒸餾水洗。

4、 （貼壁細胞）滴加 ACP孵育液覆蓋細胞，置于37℃溫箱孵育45-60min，蒸餾水洗。

5、 復染：蘇木素或甲基綠復染液染色2-3min。如選用蘇mu素染色液復染，染色后須自來水返藍10min或1×PBS返藍3-5min。

(三) 封片觀察：

1、 （切片處理）蒸餾水稍洗，瀝去多余水分，滴加水性封片劑封片后鏡檢觀察。

2、 （貼壁細胞）蒸餾水稍洗，可帶水或1×PBS鏡下觀察。

注意事項：

1.    該染色試劑盒為酶活原位染色試劑盒，反應底物和染料易失效，收到產品后建議第一時間根據說明書 描述溫度妥善保存。

2.    對冰凍切片染色時，應減少切片在室溫暴露的時間。

3.    酶活易受多種因素影響導致衰減或消失。建議樣本新鮮取材，使用預冷固定液在2-8℃冰箱固定，時 間不宜超過24h。包埋時推薦使用低熔點蠟（52-56℃），避免熱失活。

4.    為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 酸性磷酸酶染色試劑盒偶氮偶聯法 酶類染色

產品訂購信息：

NobleRyder G9279 酸性磷酸酶染色試劑盒(偶氮偶聯法)，Acid Phophatase Stain Kit(Kaplow’s Azo Coupling Method) 4*2ml / 4*10ml / 4*20ml