諾博萊德 RNAsafe 無液氮 RNA 樣品保存液

RNAsafe 無液氮 RNA 樣品保存液

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產品內容

產品簡介

RNAsafe 是一種水相的，無毒的組織保存液體，可以迅速滲入新鮮組織細胞的胞漿中，在非凍狀態下原位穩定和保護細胞內的RNA。適用于動物組織（心，肝，腎，肌肉，睪丸，腦，脾等）、培養細胞、RNA 病毒、果蠅、細菌、白細胞、全血、一些植物組織等。

特別適合野外和臨床采集樣本，無需攜帶液氮，浸入RNAsafe后，新鮮組織細胞中RNA可以完好地在37℃下保存一天, 在25℃下保存一周, 4℃下保存一個月, 在-20℃或-80℃下長期保存。RNA 病毒樣品(如HCV 和HIV)可在37℃保存一個月。

產品特點

操作容易：將組織jian成適當大小，浸沒在RNAsafe中即可使其RNA不被降解。

無需液氮：使樣品的保存不需液氮干冰或-80℃冰箱 尤其適用于臨床和野外樣品的快速和大規模采集。

方便運輸：處理過的樣品能在25℃保存一周，使樣品郵寄和運輸變得容易。

多次凍融: 經RNAsafe處理的樣品可反復凍融多次，不影響提取的RNA 質量。

可比性強: 能減少重復實驗中的誤差，對大規模基因表達譜的分析尤其有用。

兼容性廣: 多種總RNA提取試劑都可以用來提取保存在RNAsafe內的樣品。還可直接用于組織切片免疫學和流式細胞分析而不影響RNA提取的質量。

一、如何使用RNAsafe：

RNAsafe只用于新鮮組織，浸泡入RNAsafe前禁止冷凍組織。只需要迅速將新鮮組織jian成長，寬，高任意一邊厚度<0.5厘米浸泡入RNAsafe即可（只要有一邊厚度不超過0.5厘米，RNAsafe可以迅速滲透，其它兩邊的尺寸并不重要）。將新鮮組織浸泡在5倍體積的RNAsafe中，按要求存放在適當的溫度。

1. 動物組織

RNAsafe并不破壞或者溶解組織結構，因此浸泡在RNAsafe中達到滲透平衡的組織可以從RNAsafe中取出，然后切成更小的塊，然后放回到RNAsafe中下次繼續使用。小器官如小鼠肝，腎，和脾不需要剪切，可以完整的存放在RNAsafe中。

2. 植物組織

很多植物組織直接浸泡入RNAsafe即可，有的植物有天然滲透屏障如臘質保護層，需要先破壞掉臘質層，便于RNAsafe滲透。

3. 組織培養細胞

細胞吹打下來后，離心收集細胞,棄上清，用冰浴的PBS緩沖液洗一次去除殘留培養液。將細胞懸浮在少量PBS緩沖液中。加入五到十倍體積RNAsafe, 混均。

4. 血和血漿

和紅細胞和血清分離的白細胞可以和組織培養細胞一樣的保存。RNAsafe也可以保存抗凝全血，血清和血漿。對于全血加入3倍體積RNAsafe，混勻。

5. 酵母

離心收集3X108的細胞（>12，000g離心兩分鐘），立刻將細胞團重懸在0.5~1 ml 的RNAsafe中。酵母細胞可以保存在RNAsafe中25℃8小時或者4℃一個星期。如果要保存存更長時間，將酵母細胞在RNAsafe中放置一個小時后， 再次于>12,000g離心5分鐘，將酵母細胞團放入液氮瞬時冷凍后放置于–80℃儲存。

6. 細菌

細菌并不能在RNAsafe 中生長，但是RNAsafe并不破壞細菌，E. coli在4℃ 保存一個月仍舊可以提出完整的RNA。

二、RNAsafe中樣本的存放：

1. 存放在–80℃

文檔樣品長期保存用。將RNAsafe中樣本放置于4℃過夜，然后將樣本撈出，盡量去除干凈RNAsafe液體，然后放置于–80℃. 對于組織培養細胞，則不需要去除RNAsafe，直接冷凍于–80℃，并不會裂解細胞。樣品使用時可以在室溫融化，并且還可以再次冷凍而不影響RNA的完整性和產量。

2. 存放在–20℃

將RNAsafe中樣本放置于4℃過夜，然后轉移到–20℃。在–20℃樣品并不會被冰凍，但是可能會形成一些結晶，這并不會影響將來的RNA提取。樣品使用時可以在室溫融化，并且還可以再次冷凍而不影響RNA的完整性和產量。

3. 存放在4℃

樣本可以在4℃存放一個月。

4. 存放于25℃

存放于25℃樣本的RNA在一周內保持完整，保存兩周的樣品RNA有輕微降解，勉強能用于northern analysis, 但是質量足夠用于nuclease protection assay or RT-PCR analysis。

5. 存放于37℃

存放于37℃樣本的RNA在24小時內保持完整，3天的時候有部分降解。

三、RNAsafe 保存樣本的 RNA 提取：

將樣本從RNAsafe中取出，RNAsafe可以直接倒入水池，用自來水沖洗即可，不需特殊處理。

1. 組織

需要用干凈鑷子將樣本從RNAsafe中撈出，用吸水紙稍稍吸去殘留的RNAsafe后，可以和新鮮組織一樣按照液氮研磨，然后勻漿處理的標準程序進行提取RNA。

2. 細胞

對于儲存在RNAsafe中的細胞有兩種選擇。一是去除RNAsafe后提取RNA, 另一個是直接從細胞和RNAsafe的混合物提取。

a. 去除 RNAsafe 后提取 RNA

存放于RNAsafe中的細胞變得不那么脆弱，可以承受較高的離心速度而不被裂解。我們有在5000g離心成功收集細胞的經驗，由于每種細胞的強度不一樣， 可以先用不重要的細胞做個預試驗，以保證在使用的速度下離心不會破壞細胞。另一個選擇是在離心前加等體積的

PBS稀釋RNAsafe和細胞的混合物，以減少溶液的密度，使細胞溶液可以沉淀下來。

b. 不去除 RNAsafe，直接提取 RNA也可以直接加10倍體積的一步法提取試劑（如RNAzol，Trizol reagent）到細胞和RNAsafe的混合物，然后按照正常步驟操作。

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