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2× FastLong Taq PCR Master Mix(含染料)
2×FastLong Taq PCR Master Mix含染料
目錄號:71810
產品內容
產品成份 | 71810-05 | 71810-0100 |
2× FastLong Taq PCR Master Mix | 5x 1ml | 100x 1ml |
保存條件
-20℃保存，有效期 2 年。經常使用，可置于 4 °C 保存，有效期 3 個月。
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
產品簡介
本產品包含FastLong Taq DNA Polymerase、dNTPs和優化的反應緩沖液，濃度為2×，擴增速度（5-10s/kb）是普通Taq mix速度的6倍，保真度是Taq酶的3倍， 適用于擴增各種小于10Kb的DNA模板！
PCR產物3’端帶A尾，純化后可直接用于TA載體克隆（Cat#V114-20）。
本產品含紅色示蹤染料，不需添加上樣緩沖液即可直接上樣進行電泳；也可經過純化處理，以用于酶切、連接、測序等后續操作。
產品特點
1. 高產：產量是普通 Taq 酶的 2 倍！
2. 高效：延伸速度 5-10s/kb，一般 0.5 小時完成 PCR！
3. 高成功率：對于高 GC 模板和特殊結構的復雜模板有良好效果！
2× FastLong Taq PCR Master Mix 使用說明：
一、配制 PCR 反應體系：(于冰上配制)
Component | 20 μl Reaction | 50 μl Reaction | FinalConcentration |
2×FastLongTaqPCRMix | 10 μl | 25 μl | 1 × |
Forward Primer (10μM) | 0.4 μl | 1 μl | 0.2 μM |
Reverse Primer (10 μM) | 0.4 μl | 1 μl | 0.2 μM |
Template DNA | as required | as required | |
ddH2O | up to 20 μl | up to 50 μl |
參考模板用量（50 μl 反應體系）：
質粒：0.1-10 ng；細菌基因組：10-100 ng；人類基因組：50-150 ng；cDNA：1-5 μl 。
二、建議 PCR 循環條件：
Step | Temperature | Time | Cycle Number |
Initial denaturation | 94℃ | 3 minutes | |
Denaturation | 94℃ | 10 seconds | 25-35 cycles |
Annealing | 55℃ | 10 seconds | |
Extension | 72℃ | 10 seconds / kb | |
Final Extension | 72℃ | 5 minutes | |
4-8℃ | Hold |
注意事項：
a. 片段≥3kb 或產量較低時，可以采用 15-20 秒/kb 的延伸速度或采用較多循環數。
b. 對于高 GC 含量或者有二級結構的模板，應該適當延長預變性時間到 5 分鐘，變性時間可以適當提高 5-10 秒。擴增效果不佳時，還可加入 DMSO 到終濃度 1-8%。
2×FastLong Taq PCR Master Mix含染料
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