銷售咨詢熱線：
13269190901
H2S 含量測定試劑盒說明書
微量法 100T/96S
H2S 是一種新型氣態信號分子，存在于腦內的神經遞質，生理濃度的H2S 對神經系統海馬的長時程增強功能具有重要的調節作用，并對自發性高血壓、出血性休克及肝硬化等疾病的過程發揮著重要的病理生理效應。
H2S 與醋酸鋅、N, N-二甲基對苯二胺和硫酸鐵銨等反應生成亞甲基藍，亞甲基藍在 665nm 處有最大吸收峰，通過測定其吸光值可計算H2S 含量。
產品名稱 | DC6002-100T/96S | Storage |
提取液：液體 | 100ml | 4℃ |
試劑一：液體 | 25ml | 4℃ |
試劑二：液體 | 16ml | 4℃ |
試劑三：液體 | 8ml | 4℃避光 |
試劑四：液體 | 8ml | 4℃ |
試劑五：液體 | 1.5ml | 4℃避光 |
說明書 | 一份 | |
自備儀器和用品：
天平、低溫離心機、酶標儀、96 孔板、蒸餾水。
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
1. 組織：按照組織質量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml 提取液）進行冰浴勻漿，然后 10000g，4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
2. 細菌、真菌：按照細胞數量（104 個）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加入 1ml 提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后 10000g， 4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測。
3. 血清（漿）：直接測定。
1、酶標儀預熱 30min，調節波長至 665nm。
2、操作表
空白管 | 測定管 | |
樣品（μl） | 150 | |
H2O（μl） | 150 | |
試劑一（μl） | 150 | 150 |
充分震蕩混勻 | ||
試劑二（μl） | 150 | 150 |
10000g，4℃，離心 10min，去上清，留沉淀 | ||
H2O（μl） | 150 | 150 |
10000g，4℃，離心 10min，去上清，留沉淀 | ||
試劑一（μl） | 75 | 75 |
試劑三（μl） | 75 | 75 |
充分震蕩混勻 | ||
試劑四（μl） | 75 | 75 |
10000rpm，4℃，離心 10min，吸取 200μl 上清于 96 孔板中 | ||
試劑五（μl） | 10 | 10 |
混勻，25℃靜置 5min，測定 665nm 吸光值，記為A 測定和A 空白，ΔA=A 測定-A 空白。 | ||
用 96 孔板測定的計算公式如下
標準曲線回歸方程為：y = 0.0022x，R2 = 0.9988
（1） 組織樣品
a.按照蛋白濃度計算
H2S（nmol/mg prot）= b.按照樣本重量計算 H2S（nmol/g 鮮重）=
(3) 細胞
H2S（nmol/104 cell）=
ΔA ×V 反總÷(V 樣×Cpr)=681.8×ΔA÷Cpr
0.0022
ΔA ×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)= 681.8×ΔA÷W
ΔA ×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×細胞數量(萬個)）=681.8×ΔA÷細胞數量（萬個）
（2） 液體樣品H2S（nmol/ml）=
ΔA ×V 反總÷V 樣= 681.8×ΔA
0.0022
V 反總：反應總體積，0.225ml；V 樣：反應中樣品體積，0.15ml；V 樣總：加入提取液體積，1ml；W：樣品質量，g；Cpr：蛋白濃度，mg/ml
注意事項:zui低檢出限為 1nmol/ml。
電話
微信掃一掃
