諾博萊德 植物核蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質譜適用）-酶法

植物核蛋白提取試劑盒-酶法 常備現貨

產品貨號：P5078

產品名稱：植物核蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質譜適用）-酶法

產品規格：50T/100T

產品簡介：

中文名稱：植物核蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質譜適用）-酶法

規格：100T ; 50T

儲存條件：2-8℃，1 year

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

NobleRyder P5078 植物核蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質譜適用）-酶法

植物核蛋白提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種植物細胞和各種實體植物組織，如葉片、根、種子等植物組織中提取核蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時內完成。制備的核蛋白不僅純度高，保持天然活性，而且絕少交叉污染。本試劑盒含有的du特配方能夠有效溶解植物核組份。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。本試劑盒的蛋白提取組份中不含有不可透析除去的去垢劑組份，不含SDS、TritonX-100、chaps等可能影響質譜實驗的組份，最后得到的蛋白質樣品經過透析或者脫鹽處理后將不含有去垢劑、高濃度鹽等影響，基本可以滿足下游任意的蛋白質組學相關實驗研究。本產品的蛋白酶抑制劑混合物中不含AEBSF，可以避免由于AEBSF導致的質譜峰漂移，因此使用本產品提取的蛋白樣品可以用于質譜（MassSpectrometry,MS）檢測和分析，蛋白質組學（proteomics）等相關研究。本試劑盒提取的蛋白也可用于WesternBlotting、蛋白質電泳、免疫沉淀、ELISA、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。本試劑盒中不含有EDTA，與金屬螯和層析等下游應用兼容。

適用樣本：植物

注：

1. 提取液A 長期不用請置-20℃保存。

2. 蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。

3. 蛋白酶抑制劑在 2-8℃低溫時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。

4. 試劑拆封后請盡快使用完！

產品簡介：

植物核蛋白提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種植物細胞和各種實體植物組織，如葉片、根、種子等植物組織中提取核蛋白。提取過程簡單方便，可在 1 小時內完成。制備的核蛋白不僅純度高，保持天然活性，而且絕少交叉污染。

本試劑盒含有的du特配方能夠有效溶解植物核組份。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合

物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。

本試劑盒的蛋白提取組份中不含有不可透析除去的去垢劑組份，不含 SDS、Triton X-100、chaps 等可能影響質譜實驗的組份，最后得到的蛋白質樣品經過透析或者脫鹽處理后將不含有去垢劑、高濃度鹽等成分，基本可以滿足下游任意的蛋白質組學相關實驗研究。

本產品的蛋白酶抑制劑混合物中不含 AEBSF，可以避免由于 AEBSF 導致的質譜峰漂移，因此使用本產品提取的蛋白樣品可以用于質譜(Mass Spectrometry, MS)檢測和分析，蛋白質組學(proteomics)等相關研究。

本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。

本試劑盒中不含有 EDTA，與金屬螯和層析等下游應用兼容。

本試劑盒提取的蛋白也可用于 Western Blotting、蛋白質電泳、免疫沉淀、ELISA、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。

本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。

本試劑盒中不含有 EDTA，與金屬螯和層析等下游應用兼容。

本試劑盒提取的蛋白樣本含有高濃度的鹽成分，不可直接用于2D 電泳，如下游實驗需要直接用于等電聚焦、雙向電泳，請使用其他貨號試劑盒。也可以將最后樣品除鹽后再用于2D 電泳，用脫鹽柱脫鹽處理。

本試劑盒采用酶法提取，酶法提取制備的植物核蛋白，回收率提高，純度高，但是耗時較長。非酶法的提取試劑盒提取過程簡單方便，速度快，可在1 小時內完成，而且絕少交叉污染，提取得到的蛋白活性優于酶法提取，但是回收率相比酶法較低。如果需要更加快捷的提取試劑盒，可以選擇非酶法的提取試劑盒，對提取速度沒有要求的話，可以選擇酶法提取試劑盒。請根據實際需要選擇試劑盒。

自備試劑和儀器：

離心機、振蕩器、勻漿器、渦旋混勻器、移液器、冰箱、冰盒，1×PBS 緩沖液、蛋白定量試劑盒，離心管、吸頭、一次性手套、100 μm 細胞篩。

產品特點：

1. 使用方便。

2. 含蛋白穩定劑，提取的蛋白穩定。

3. 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。

4. 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含 6 種獨立的蛋白酶抑制劑 AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括絲an酸蛋白酶、半胱an酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

使用方法：

一、使用注意事項：

1. 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。

2. 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

3. 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

4. 可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

二、植物組織核蛋白提取：

1. 提取液制備：

將試劑 B1 和試劑 B2 混合，配成蛋白提取液 B，充分混勻備用。

每 500μl 提取液 B 中加入 2μl 蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。

【注】：

1) 根據需要處理的樣品數量準備蛋白提取液，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。

2) 加過蛋白酶抑制劑的提取液一周內未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制劑。

2. 取 500 mg-1 g 新鮮植物葉片樣本，用純水洗凈擦干后去除葉梗和粗脈，用手shu剪刀或鋒利的刀片剪切碎，切成 0.5 mm*0.5 mm 細塊。

3. 加入 500μl 提取液 C，充分混勻。

4. 將懸液置振蕩器上室溫振蕩 12-72 小時。

【注】：

1) 使用振蕩器/搖床的較低轉速，保證提取液能輕微晃動即可。

2) 沒有振蕩條件也可以不振蕩，中間每隔幾小時用移液器輕輕吹打混勻即可。

3) 不同類型的植物樣本需要處理的時間差異較大。擬南芥較易處理，鮮嫩葉片較易處理，年齡小的樣本處理時間短。

4) 部分細胞壁較厚的植物類型可能需要處理更長時間。可以延長至 72 小時以上處理以提高得率。

5. 在 1000×g 條件下離心 5-10 分鐘，棄上清，收集沉淀。

【注】：

1) 有條件可以用 100 um 細胞篩網過濾提取液處理液后，收集濾液再離心。

2) 沒有細胞篩可以不過濾。

6. 在沉淀中加入 1 ml 提取液 A 后用勻漿機充分勻漿或者用勻漿器充分勻漿。

7. 將勻漿用 100μm 細胞篩過濾。

【注】：

1) 液體量少時可以加入 1-2 ml PBS 混勻后再用細胞篩過濾。

2) 沒有細胞篩時可以不過濾，將勻漿液靜置 1 分鐘，待大的沒有破碎的組織塊自然沉降，吸取上清。

3) 部分黏液較多的植物樣本可能難以吸取，可以將 1 ml 吸頭的口剪掉一點再吸。

8. 將濾液在 100×g 條件下離心 3 分鐘，棄沉淀，收集上清。

【注】：

1) 部分黏液較多的植物樣本可能很粘稠難以離心，可以加入 1-2 ml PBS 稀釋，充分混勻

后再離心。

9. 在 2000×g 條件下離心 10 分鐘，棄上清，收集沉淀。

10. 在沉淀中加入 150-250μl 提取液 B，充分混勻。

11. 置振蕩器 2-8℃振蕩 30-45 分鐘。

【注】：

1) 用振蕩器/搖床的較低轉速，保持液體有輕微晃動即可。

2) 沒有低溫振蕩條件可以不振蕩，在 2-8℃靜置，稍微延長處理時間，中間每隔幾分鐘用移液器吹打混勻。

12. 在 4℃，12000×g 條件下離心 15 分鐘。

13. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即得到核蛋白。

14. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。

【注】：

1) 建議用 BCA 法進行蛋白定量。

2) 蛋白樣品-80℃存放一年沒有問題。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被細菌污染。

15. 將蛋白樣品透析處理或者脫鹽柱脫鹽處理后用于下游實驗。

【注】：

1) 蛋白樣品中含有鹽，需要脫鹽處理后用于雙向電泳。

2) 經透析或脫鹽離心柱處理的蛋白樣品不含有去垢劑和高濃度鹽。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優化實驗條件，取得優良實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并che底清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。

植物核蛋白提取試劑盒-酶法 常備現貨

產品訂購信息：

P5078  植物核蛋白提取試劑盒（蛋白組實驗、質譜適用）-酶法  50T/100T